Effect Of Enoxaparin And Heparin On Apoptotic ,Inflammatory, And Antioxidant Biomarker in SW480, And LNCaP Cell Line

الموضوعات

طب

الملخص

Cancer starts when cells in the body begin to grow out of control. Cells in nearly any part of the body can become cancer cells, and can then spread to other areas of the body. The most frequent type of cancer worldwide is colon cancer. Operation, radiation, targeted therapy, and immune therapy are all treatments for colon cancer. Prostate cancer is the most common cancer among men. In the present study, an effort has been made to assess the effect of heparin and enoxaparin on the viability of the normal Vero cell line, SW480 colon cancer cell line, and LNCaP prostate cancer cell line. The second objective was to evaluate the effect of heparin and enoxaparin on the expression of TNF-α and caspase3 in SW480 colon cancer and LNCaP prostate cancer cells. In addition, this study aimed to evaluate the antioxidant effect of heparin and enoxaparin on SW480 colon cancer and LNCaP prostate cancer cell lines. The experimental work was performed in the post-graduate student’s research laboratory at the College of Medicine/University of Babylon during the period from December 2021 to April 2022. The first experiment was the cytotoxicity assay. Vero normal, prostate cancer (LNCaP), and colon cancer (SW480) cell lines were seeded in 96-well tissue culture plates. After 24 hours, cells were exposed to different concentrations of drugs (heparin or enoxaparin) at serial dilutions ranging from (1000, 500, 250, 125, 62 to 31 μg/ml). Four replicates were used for each concentration of both heparin and enoxaparin for each type of cells, along with four replicates as a control group for each cell type. All plates were incubated for 24 hours at 37°C, then the MTT cytotoxicity assay was performed. The result showed that heparin causes a significant (P≤0.001) decrease in the viability of Vero cells at all concentrations. Heparin significantly (P≤0.050) reduces the viability of SW480 colon cancer cells at the concentrations of (1000 and 500 μg/ml), while it has no significant effect on the viability of the LNCaP prostate cancer cell line. The result showed that enoxaparin significantly (P≤0.050) reduces the viability of SW480 colon cancer cells at all concentrations but has no effect on the viability of Vero and LNCaP prostate cancer cells. In the second experiment, LNCaP and SW480 cells in 96-well tissue culture plates were treated with different concentrations of the drugs (heparin or enoxaparin) at serial dilutions ranging from 1000 to 31 μg/ml (four replicates were used for each concentration) along with four replicates as a control group for each cell type. Then incubated for 24 hours, at the end of the exposure period, they were taken for immunoassay by ELISA method for the measurement of TNF-alpha and caspase3 concentrations. The result showed that heparin has no significant effect on TNF-α level in SW480 colon cancer cells; however, it causes a significant (P≤0.050) decrease in TNF-α level at the concentrations (1000, 250, 125 μg/ml) in the LNCaP prostate cancer cell line. Enoxaparin significantly (P≤0.050) reduces TNF-α release at the concentrations (1000, 250, 31 μg/ml) in SW480 colon cancer cells but has no significant effect on TNF-α release in the LNCaP prostate cancer cell line. Heparin does not affect caspase3 levels in SW480 colon cancer and LNCaP prostate cancer cells. Enoxaparin significantly (P≤0.050) increases caspase3 level in SW480 colon cancer cells, while it has no significant effect on caspase3 level in LNCaP prostate cancer cells. For measuring the total antioxidant activity, the CUPRAC method was performed to detect the antioxidant effect of heparin and enoxaparin on SW480 colon cancer cells and LNCaP prostate cancer cell lines cultured in 96-well plates. The result showed that heparin has no significant antioxidant effect in SW480 colon cancer cells but causes significant (P≤0.050) increase in antioxidant effect at the concentrations (1000, 250, 31 μg/ml) in the LNCaP prostate cancer cell line. The result showed that enoxaparin has no significant antioxidant effect in SW480 colon cancer cells but has significant (P≤0.050) increase in antioxidant effect at the concentration (250 μg/ml) in LNCaP prostate cancer cells.

روابط وملفات

التعريف والنوع

رقم الوثيقة

0a357c57-6748-41d8-80b8-8926903e8026

رقم العقد

0

نوع الوسائط

Crawler

نوع المحتوى

الرسائل العلمية

صيغة المصدر

رسائل ماجيستير

نوع الملف

pdf text

أسماء الملفات

993936_1.pdf

بيانات النشر

ترجمة العنوان

تأثير الاينوكسابارين والهيبارين على موت الخلايا المبرمج وعلامات الالتهاب ومضادات الأكسدة في خط الخلايا SW480 و LNCaP

ألقاب المؤلفين

[{"name_ar":"قيصر مظلوم","title_ar":"اشراف","title_en":"Supervision"},{"name_ar":"ماجد كاظم عباس","title_ar":"اشراف","title_en":"Supervision"},{"name_ar":"نور كريم مزعل عبيد","title_ar":"اعداد","title_en":"Preparation"}]

اللغة

English

المصدر والدورية

اسم المصدر

Effect Of Enoxaparin And Heparin On Apoptotic ,Inflammatory, And Antioxidant Biomarker in SW480, And LNCaP Cell Line

المحتوى والصفحات

عدد الصفحات

0

ترجمة الملخص

يبدأ السرطان عندما تبدأ خلايا الجسم في النمو خارج نطاق السيطرة.و يمكن أن تتحول الخلايا الموجودة في أي جزء من الجسم تقريبًا إلى خلايا سرطانية ، كما يمكن أن تنتشر بعد ذلك إلى مناطق أخرى من الجسم. سرطان القولون هو أكثر أنواع السرطانات شيوعًا على مستوى العالم. وتشمل علاجات سرطان القولون الجراحة والعلاج الكيميائي والعلاج الموجي والعلاج المناعي. اما سرطان البروستات فيعد أكثر أنواع السرطانات شيوعًا بين الرجال ، بعد سرطان الجلد. في هذه الدراسة ، تم إجراء محاولة لتقييم:1. تأثير الهيبارين والإينوكسابارين على حيوية الخلايا الطبيعية ، وخط خلايا سرطان القولون SW480 وخط خلايا سرطان البروستات LNCaP .2. الهدف الثاني تقييم تأثير الهيبارين والإينوكسابارين على TNF-α و caspase3 في خط خلايا سرطان القولون SW480 وخلايا سرطان البروستات LNCaP3. الغرض الثالث تقييم التاثير المضاد للاكسده للهيبارين والإينوكسابارين في خط خلايا سرطان القولون SW480 وخط خلايا سرطان البروستات LNCaPتم تنفيذ العمل التجريبي في مختبر الدراسات العليا/فرع الادوية / كلية الطب / جامعة بابل خلال الفترة من كانون الاول2021 الى نيسان 2022 التجربة الأولى هي اختبار السمية : خطوط الخلايا بما في ذلك خط الخلايا الطبيعية ال Vero وخلايا سرطان البروستات (LNCaP) و خلايا سرطان القولون. (SW480) تم زرع خطوط الخلايا في 96 لوحة زراعة الأنسجة.بعد 24 ساعة تم تعريض جميع الخلايا لتراكيز مختلفة من الأدوية (الهيبارين و الإينوكسابارين بتخفيفات متسلسلة تتراوح من 1000،500،250،125،62 إلى 31 ميكروغرام / مل)ولقد تم استخدام أربع مكررات لكل تركيز من الهيبارين و الإينوكسابارين لكل نوع من الخلايا مع اربع مكررات كمجموعة تحكم لكل نوع من الخلايا ، تمت حضانة كل الصفائح لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية ، وثم تم إجراء اختبار MTT لقياس السمية الخلوية.أظهرت النتائج أن الهيبارين يسبب انخفاضًا معنويًا (P ≤0.050) في قابلية بقاء خلايا الVero في جميع التراكيز. بينما يسبب الهيبارين انخفاض معنوي (P ≤0.050) في حيوية خلية سرطان القولون SW480 بتركيز (1000,500 ميكروغرام / مل) مع عدم وجود تأثير معنوي على حيوية خط خلايا سرطان البروستاتLNCaP . وكذلك أظهرت النتائج أن الإينوكسابارين يسبب انخفاضًا معنويًا (P ≤0.050) في حيوية خلايا سرطان القولون sw480 بتركيز (1000،500 ميكروغرام / مل) وليس له أي تأثير على حيوية خلايا سرطان البروستاتا Vero و LNCaP.تضمنت التجربة الثانية: سلالات الخلايا بما في ذلك سرطان البروستات (LNCaP) وسرطان القولون (SW480) حيث تم زرع خطوط الخلايا في 96 لوحة زراعة الأنسجة. وتم تعريض جميع الخلايا الى تراكيز مختلفة من الأدوية (الهيبارين و الإينوكسابارين) بتخفيفات متسلسلة تتراوح من 1000 إلى 31 ميكروغرام / مل (تم استخدام ثلاثة مكررات لكل تركيز من كل من الهيبارين والإينوكسابارين لكل نوع من الخلايا) جنبًا إلى جنب مع ثلاثة مجموعة تحكم لكل نوع خلية. ثم تم تغطية اللوحة بغطاء بلاستيكي ذاتي وحضنتها لمدة 24 ساعة ، في نهاية فترة التعرض ، تم أخذ خطوط الخلايا للمقايسة بطريقة ELISA TلقياسNF-alpha و Caspase3بينت النتائج أن الهيبارين ليس له تأثير معنوي على TNF-α في خلايا سرطان القولون SW480 ويسبب انخفاضًا معنويًا (P ≤0.050) في TNF-α عند التركيز (1000،250،125 ميكروغرام / مل) في خط خلايا سرطان البروستات LNCaPيسبب enoxaparin انخفاضًا كبيرًا (P ≤0.050) في TNF-α عند التركيز (1000،250،31 ميكروغرام / مل) في الخلايا السرطانية SW480colon وليس له تأثير كبير على TNF-α في خط خلايا سرطان البروستات LNCaP اما الهيبارين فليس له تأثير على caspase3 في سرطان القولون SW480 وخلايا سرطان البروستات LNCaP يسبب Enoxaparin زيادة كبيرة (P ≤0.050) في caspase3 في خلايا سرطان القولون SW480 وليس له تأثير كبير على caspase3 في خلايا سرطان البروستات LNCaPتضمنت التجربة الثالثة: إجراء طريقة CUPRAC للكشف عن التأثير المضاد للأكسدة للهيبارين والإينوكسابارين على خلايا سرطان القولون SW480 وخط خلايا سرطان البروستات LNCaP أظهرت النتائج أن الهيبارين ليس له تأثير مضاد للأكسدة معنوي في خلايا سرطان القولون SW480 ويسبب زيادة معنوية (P ≤0.050) في تأثير مضادات الأكسدة عند التركيز (1000،250،31 ميكروغرام / مل) في خط خلايا سرطان البروستات . LNCaPأظهرت النتائج أن الإينوكسابارين ليس له تأثير مضاد للأكسدة معنوي في خلايا سرطان القولون SW480 ويسبب زيادة معنوية (P ≤0.050) في تأثير مضادات الأكسدة عند التركيز (250 ميكروغرام / مل) في خلايا سرطان البروستات LNCaP .

كلمات الباحثين

Colon cancer, prostate cancer, heparin, enoxaparin, cell lines, MTT assay, TNF-α, caspase 3, antioxidant activity

إشراف وإعداد

الإشراف

قيصر مظلوم, ماجد كاظم عباس

الإعداد

نور كريم مزعل عبيد

الاقتباسات الببليوغرافية