Effect of Ricinus communis, phenytoin and metformin and their combination on wound healing: An in vitro study

الموضوعات

طب

الملخص

Wound is a physical injury of the body that is described by disruption of normal structures of the body. A wound may cause damage to superficial skin layers and reach structures underlying the skin. Wound healing is an important physiological process to maintain the integrity of skin after trauma, either by accident or by intentional procedure. The normal wound healing involves three successive but overlapping phases, including hemostasis/inflammatory phase, proliferative phase, and remodeling phase. This study aimed to investigate the effect of Ricinus communis leaf extracts (ethanolic and aqueous), metformin, and phenytoin alone and in combination on healing wounds induced on the normal Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) cell line. This study includes two parts: Part One: In order to determine the safety of tested agents (ethanolic and aqueous plant extracts, metformin, and phenytoin), a pilot study was performed to investigate their cytotoxicity on the MDCK normal cell line and accordingly a range of concentrations to be used for the wound healing assay was chosen. In the cytotoxicity assay, the MDCK cell line was seeded in tissue culture 96-well plates and treated with each ethanolic and aqueous Ricinus communis leaf extract with different concentrations (31.25, 62.5, 125, 250, 500, 1000 μg/ml). The same experiment was done using different concentrations of metformin (3.9, 7.8, 15.6, 31.25, 62.5, 125, 250, 500, 1000, 2000 μg/ml) or phenytoin (62.5, 125, 250, 500, 1000, 2000 μg/ml). After that, all treated cells were incubated for 24 hours at 37°C, then the MTT assay was performed. Part Two: A vertical wound was made by using a 200 μl sterile plastic micropipette tip pressed firmly against the cell monolayer of the tissue culture plate. Then the wounded cells were exposed to different concentrations of each tested agent obtained from part one of this study. Six experiments were conducted as follows: Treatment of the MDCK wound model with (15.6, 31.25, 62.5, 125, 250, 500 μg/ml) of ethanolic leaf Ricinus communis extract. Treatment of the MDCK wound model with (15.6, 31.25, 62.5, 125, 250, 500 μg/ml) of aqueous leaf Ricinus communis extract. Treatment of the MDCK wound model with (3.9, 7.8, 15.6, 31.25, 62.5, 125, 250, 500, 1000 μg/ml) of metformin. Treatment of the MDCK wound model with a combination of metformin serial dilution (125, 250, 500, 1000 μg/ml) plus either 250 or 500 μg/ml of Ricinus communis leaf ethanolic extract. Treatment of the MDCK wound model with (1.9, 3.9, 7.8, 15.6, 31.25, 62.5 μg/ml) of phenytoin. Treatment of the MDCK wound model with a combination of phenytoin serial dilution (1.9, 3.9, 7.8, 15.6, 31.25, 62.5 μg/ml) plus either 250 or 500 μg/ml of Ricinus communis leaf ethanolic extract. After that, the wound areas were digitally photographed every 3 hours up to 12 hours. The cytotoxicity results showed that the concentration (125 μg/ml) of Ricinus communis leaf aqueous extract significantly increased (p ≤ 0.05) the viability of the MDCK cell line, while no significant differences were found (p > 0.05) after treatment with the ethanolic leaf extract in comparison to the control group. The results showed that the viability of the MDCK cell line was significantly increased (p ≤ 0.05) after treatment with the concentration (62.5 μg/ml) of each metformin and phenytoin, while at high concentrations of metformin (2000 μg/ml) and phenytoin (2000, 1000, 500, 250 μg/ml), the viability was significantly decreased (p < 0.001). Wound healing results showed that all concentrations except 500 μg/ml of Ricinus communis leaf ethanolic extract caused highly significant decrease (p ≤ 0.001) in the wound diameter, while all concentrations of Ricinus communis leaf aqueous extract caused highly significant decrease (p ≤ 0.001) in the wound diameter with complete healing in comparison to the control group. Also, results showed that all concentrations of metformin except (15.6, 31.25, 62.5 μg/ml) and all concentrations of phenytoin except the lowest one (1.9 μg/ml) caused highly significant decrease (p ≤ 0.001) in the diameter of the wound with complete healing. Regarding the combined effect of Ricinus communis leaf ethanolic extract plus either metformin or phenytoin, results showed that both combinations caused highly significant decrease (p ≤ 0.001) in wound diameter. The healing results showed incomplete healing of wounds treated with all concentrations of metformin plus Ricinus communis leaf ethanolic extract except 250 μg/ml of plant extract plus 125 and 250 μg/ml of metformin, and complete healing with all concentrations of phenytoin plus Ricinus communis leaf ethanolic extract except those containing 500 μg/ml of plant extract plus 31.25 and 62.5 μg/ml of phenytoin, which caused incomplete wound healing. In conclusion: Ricinus communis (ethanolic and aqueous) leaf extracts, metformin, and phenytoin have a healing effect on the MDCK cell line wound model when used alone, better than when used in combination, except for the combination of phenytoin plus 250 μg/ml of plant extract, which resulted in faster wound healing.

روابط وملفات

التعريف والنوع

رقم الوثيقة

05ed15ae-102b-4d94-a4bf-d12075a169b0

رقم العقد

0

نوع الوسائط

Crawler

نوع المحتوى

الرسائل العلمية

صيغة المصدر

رسائل ماجيستير

نوع الملف

pdf text

أسماء الملفات

994017_1.pdf

بيانات النشر

ترجمة العنوان

تأثير نبات الخروع ,والفينيتوين والمتفورمين ومزيجهم على شفاء الجروح: دراسة مختبرية

ألقاب المؤلفين

[{"name_ar":"انتصار جواد حمد المختار","title_ar":"اشراف","title_en":"Supervision"},{"name_ar":"دنيا عبد الحسين شاكر ناجي","title_ar":"اعداد","title_en":"Preparation"}]

اللغة

English

المصدر والدورية

اسم المصدر

Effect of Ricinus communis, phenytoin and metformin and their combination on wound healing: An in vitro study

المحتوى والصفحات

عدد الصفحات

0

ترجمة الملخص

الجرح: هو كل إصابة، مهما كانت بسيطة، تصيب الجسم أو تؤثر بصحته نتيجة عنف خارجي واقع عليه. ويعرف الجرح طبياً بأنه انقطاع استمرارية الجلد وغيره من أنسجة الجسم نتيجة التعرض لشدة خارجية. التئام الجروح: هي عملية بيولوجية طبيعية في الجسم البشري، وتشمل العملية أربع مراحل مبرمجة بدقة عالية: تخثر الدم (الإرقاء)، والالتهاب، ونمو الأنسجة (الانتشار)، وإعادة البناء. يمكن أن تتداخل العديد من العوامل مع واحدة أو أكثر من مراحل هذه العملية، مما يتسبب في التئام الجروح بشكل غير لائق أو ضعيف. هدفت هذه الدراسة إلى البحث في تأثير كل من مستخلص أوراق نبات الخروع (Ricinus communis) (الإيثانولي والمائي)، متفورمين، والفينيتوين لوحدها ومع بعضها في التئام جروح أحدثت على الخلايا الظهارية المأخوذة من النبيب الكلوي (MDCK). تتضمن هذه الدراسة جزأين: الجزء الأول: من أجل تحديد سلامة العوامل المختارة (المستخلص الإيثانولي والمائي للنبات، متفورمين، والفينيتوين)، تم إجراء دراسة استطلاعية للتحقيق في سميتها الخلوية على خط الخلايا الطبيعية (MDCK)، ووفقاً لذلك تم اختيار مجموعة من التراكيز لفحص التئام الجروح. لفحص السمية الخلوية، تم إنبات خط الخلايا الطبيعية (MDCK) في طبق زرعي من 96 مكانًا زرعيًا، وتمت معالجتها بكل نوع من المستخلص الإيثانولي والمائي لأوراق نبات الخروع (Ricinus communis) مع مختلف التراكيز (31.25، 62.5، 125، 250، 500، 1000 ميكروغرام/مل). تم إجراء نفس التجربة باستخدام تراكيز مختلفة من المتفورمين (3، 7.8، 15.6، 31.25، 62.5، 125، 250، 500، 1000، 2000 ميكروغرام/مل) أو الفينيتوين (62، 125، 250، 500، 1000، 2000 ميكروغرام/مل). بعد ذلك تم حضن جميع الخلايا المعالجة لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية، ثم تم إجراء الفحص باستخدام التحليل اللوني للفعالية الحيوية MTT. الجزء الثاني: تم إجراء جرح عمودي باستخدام micropipette tip حجم 200 μl بالضغط بقوة على الطبقة الأحادية للخلية في طبق الزرع النسيجي. وبعد ذلك تم تعريض الخلايا المجروحة لمختلف التراكيز لكل عامل مفحوص من الجزء الأول لهذه الدراسة. تم إجراء ست تجارب على النحو التالي: التجربة الأولى: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع (15.6، 31.25، 62.5، 125، 250، 500 ميكروغرام/مل) للمستخلص الإيثانولي لأوراق نبات الخروع. التجربة الثانية: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع (15.6، 31.25، 62.5، 125، 250، 500 ميكروغرام/مل) للمستخلص المائي لأوراق نبات الخروع. التجربة الثالثة: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع (3.9، 7.8، 15.6، 31.25، 62.5، 125، 250، 500، 1000 ميكروغرام/مل) للمتفورمين. التجربة الرابعة: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع المتفورمين بسلسلة تخافيف (125، 250، 500، 1000 ميكروغرام/مل) بالاشتراك مع 250 أو 500 ميكروغرام/مل للمستخلص الإيثانولي لأوراق نبات الخروع. التجربة الخامسة: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع (1.9، 3.9، 7.8، 15.6، 31.25، 62.5 ميكروغرام/مل) للفينيتوين. التجربة السادسة: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع الفينيتوين بسلسلة تخافيف (1.9، 3.9، 7.8، 15.6، 31.25، 62.5 ميكروغرام/مل) بالاشتراك مع 250 أو 500 ميكروغرام/مل للمستخلص الإيثانولي لأوراق نبات الخروع. بعد ذلك تم تصوير منطقة الجرح رقمياً كل ثلاث ساعات بدءًا من الساعة 9 صباحاً حتى الساعة 9 مساءً (0، 3، 6، 12 ساعة) على التوالي. بالمقارنة مع الخلايا التي لم تتعرض للعلاج، أظهرت نتائج السمية الخلوية أن المستخلص المائي لأوراق نبات الخروع (Ricinus communis) بتركيز 125 ميكروغرام/مل زاد معنويًا (p ≤ 0.05) من حيوية الخلايا الطبيعية (MDCK)، بينما لم يطرأ تغير ملحوظ (p > 0.05) في حيوية الخلايا للمستخلص الإيثانولي. أظهرت النتائج زيادة معنوية (p ≤ 0.05) في حيوية الخلايا الطبيعية (MDCK) بعد معاملتها بتركيز 62.5 ميكروغرام/مل لكل من المتفورمين والفينيتوين، بينما التركيزات العالية للمتفورمين (2000 ميكروغرام/مل) والفينيتوين (2000، 1000، 500، 250 ميكروغرام/مل) أظهرت انخفاضًا كبيرًا في حيوية الخلايا (p < 0.001).

كلمات الباحثين

Wound healing, MDCK cells, Ricinus communis leaf extracts, Metformin, Phenytoin, Cytotoxicity, Cell viability, Laboratory experiments, Therapeutic effect.

إشراف وإعداد

الإشراف

انتصار جواد حمد المختار

الإعداد

دنيا عبد الحسين شاكر ناجي

الاقتباسات الببليوغرافية