Etude de l'embryogenèse somatique chez le palmier dattier (phoenix dactylifera L.) et caractériation moléculaire du matériel végétal initial en vue de l'étude de la conformité des vitroplants

الموضوعات

علوم بحتة وطبيعية

الملخص

L’objectif de ce travail est la régénération des cultivars, la conservation des cultivars rares, appréciés pour la qualité dattière, ou la résistance à la maladie du bayoud ainsi que la rechercher des marqueurs spécifiques pour la caractérisation et l’évaluation de la conformité génétique des vitroplants obtenus. Trois milieux de base MS (1962) modifié sont utilisés pour l’initiation de cals embryogènes (M100, M25, et P12.5). La callogènese la plus importante a été observée en présence de 2,4- D et picloram à des concentrations de 100 mg. l-1 et 12 mg. l-1 associés de 1 à 3 mg. l-1 d’IPA. La multiplication des cals est obtenue sur des milieux de culture ayant des compositions hormonales identiques à celle des milieux de l’initiation. La maturation des embryons somatiques et leur germination sont obtenues sur le milieu GMN200 dépourvu d’hormone de croissance GMN200 contenant 1 mg. l-1 de Thiamine, 100 mg. l-1 de KH2PO4, 170 mg. l-1 de Na2HPO4, 200 mg. l-1 de Nitrate d'ammonium. L’élongation et l’enracinement des plantules sont obtenus sur milieu GMP contenant 100 mg. l-1 de Thiamine chlorhydrate, 170 mg. l-1 de NH2PO4, 200 mg. l-1 de Nitrate d'ammonium, 40 mg. l-1 de Adenine, 50mg. l-1 de Acide nicotinique, 50 mg. l-1 de pyridoxine. Ce travail nous a permis de produire 1905 plantules et 487 touffes de plantules prêtes à l’acclimatation à partir de 32 rejets. L’analyse du polymorphisme moléculaire par l'utilisation des marqueurs RAPD a permis de sélectionner 12 amorces: A11, D3, D4, D12, D15, D19, J4, J5, J13, J14, N12, J19. Ces amorces montrent dans leur ensemble 76% de bandes polymorphes et 24% de bandes monomorphes. Le nombre de produits d'amplification obtenu à l'aide d’une seule amorce varie de 2 à 6. L’analyse statistique des résultats grâce à un logiciel Stat ICF utilisant la méthode de la classification ascendante hiérarchique (CAH) a permis d’illustrer les relations entre les cultivars sous forme d’un dendrogramme et d’un arbre phylogénique. Ces représentations montrent un rapprochement et une similitude entre les cultivars. Ce résultat peut s’expliquer que les différents cultivars ont une base génétique commune. Afin de vérifier la conformité génétique des vitroplants, une étude préliminaire a été réalisée en comparant les profils électrophorétiques des plants régénérés par embryogenèse somatique à ceux du pied mère par des marqueurs RAPD et AFLP. Huit amorces sélectionnées par la technique RAPD, révèlent un pourcentage de bandes communes élevé qui varie de 93 % à 97%. Elle montre également la présence systématique de bandes spécifiques aux pieds mère et au vitroplants mais leur pourcentage est faible de 3% à 7%. Les 17 couples d'amorces retenus par la technique AFLP montrent un pourcentage de conformité variant de 91 % à 98% et une variation de 2% à 9%.

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026a6ac2-b6a4-41fa-a49c-ea4bfe37fda3

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0

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Crawler

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الرسائل العلمية

صيغة المصدر

رسائل ماجيستير

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word

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1377763_1.docx, 1377763_2.pdf

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ألقاب المؤلفين

[{"name_ar":" N. Bouguedoura","title_ar":"اشراف","title_en":"Supervision"},{"name_ar":" Djamila Yatta- El Djouzi ","title_ar":"اعداد","title_en":"Preparation"},{"name_ar":"M. Bennaceur ","title_ar":"اشراف","title_en":"Supervision"}]

اللغة

French

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Etude de l'embryogenèse somatique chez le palmier dattier (phoenix dactylifera L.) et caractériation moléculaire du matériel végétal initial en vue de l'étude de la conformité des vitroplants

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ترجمة الملخص

The somatic embryogenesis is the fastest way for a propagation of the palm at large scale. In addition the plantlets issues from somatic embryos are viable and vigorous. The first objective is the regeneration, and the conservation of singular cultivars, appreciates for their qualities, and disease resistance to bayoud. The second objective is the research of the specific markers for the characterization and the assessment of the genetic conformity of the vitroplants obtained by somatic embryogenesis. Three different media of MS basis (1962) modified were tested for the initiation of callus embryogenesis: M100, M25, P12.5. The most important callogenesis was observed in presence of 2,4-D and picloram at concentrations of 100 mg.l-1 and 12.5 mg.l-1 with 1 to 3 mg.l-1 d'IPA respectively. The callus multiplication took place on culture media having identical hormonal compositions to the initiation media. The maturation of the somatic embryos and their germination is obtained on the media of GMN200 without growth substance containing 1 mg.l-1 of Thiamine, 100 mg.l-1 of KH2PO4, 170 mg.l-1 of Na2HPO4, 200 mg.l-1 of ammonium Nitrate. The elongation and the rooting of the plantlets are obtained on GMP media containing 100 mg.l-1 of Thiamine hydrochlorate, 170 mg.l-1 of NH2PO4, 200 mg.l-1 of ammonium Nitrate, 40 mg.l-1 of Adenine, 50 mg.l-1 of Acid nicotinique, 50 mg. l-1 of pyridoxine. This work allowed us to produce 1905 plantlets ready to the acclimatization from 32 offshoots. The second part of this work investigates the application of the RAPD technique for cultivars discrimination. This technique permitted to select 12 primers: A11, D3, D4, D12, D15, D19, J4, J5, J13, J14, N12, and J19 showing the presence 76% of polymorphic bands and 24% of monomorphic bands of the total of the bands produced. The number of these fragments varies from 2 to 6 by primer. The statistical analysis Stat-ICF using the method of the hierarchical ascending classification (CAH) allows us to illustrate the relations between the cultivars as a dendrogram and a phylogénic tree. These representations show closeness and a likeness between the cultivars. This result can explain that the different cultivars have a common genetic basis. A preliminary study were applied to assess the genetic conformity, by comparing the électrophorétic profiles of the plantlet regenerated by somatic embryogenesis to those of the plant mother by RAPD and AFLP markers. Eight primers selected by the RAPD technique, reveal a high percent of common bands that varies 93% to 97%. It also shows the systematic presence of specific bands to the plant mother and to the vitroplants but their percent is low between of 3% to 7%. The 17 primers combination selected by the AFLP technique show a percent of conformity is between 91%to 98% and a variation between 2% to 9%.

كلمات الباحثين

AFLP, conformité des vitroplants, cultivars, date palm, embryogenèse somatique, identification, marqueurs moléculaires, molecular markers, palmier dattie, RAPD, somatic embryogenesis, التشخيص النوعي, التطابق, الفسائل, المسجلات الوراثية, النخيل التمر, زراعة الأنسجة

إشراف وإعداد

الإشراف

N. Bouguedoura, M. Bennaceur

الإعداد

Djamila Yatta- El Djouzi

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